m199培养基含earle’s混合盐,1000mg/l d-葡萄糖,100mg/l l-谷氨酰胺,2200mg/l碳酸氢钠。ph值7.0-7.4。
dmem是 dulbecco‘s modified eagle medium的缩写,所以其特点主要包括以下:(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍3)含有糖酵解途径中的重要物质--丙酮酸(4)含有微量的铁离子。经典的培养基有很多种,其中 dmem、 rpmi 1640、 mem 、 dmem/f12 都是应用1广泛的培养基。其他 如 m199 、 imdm 、 l15培养基等也用于某些细胞的培养。其具体的特征及应用如下:
m199培养基
1、细胞培养基
基础eagle培养基(basal medium eagle),1955年eagle设计,bss+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。简单、便于添加,适于各种传代细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有mem、dmem、imdm等。
2、mem细胞培养基
又称×eagle培养基(minimal essential medium),1959年在eagle‘s基础培养基(bme)上修改而来,删去赖氨酸、生物素,氨基酸浓度增加,适合多种细胞单层生长,有可高压灭菌品种,是一种1基本、试用范围的培养基,但因其营养成分所限,针对生产之特定细胞培养与表达时,并不一定是使用效果或者的培养基。
3、dmem细胞培养基
dmem是由dulbecco改良的eagle培养基,起初是为小鼠成纤维细胞设计的。dmem的氨基酸浓度是mem的两倍,维生素浓度是mem的4倍,采用双倍的hco3-和co2浓度起到更好的缓冲作用。1初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/l,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/l,这就是大家常说的低糖和高糖了。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。高糖更适合高密度悬浮细胞培养,也适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和dna转染的转化细胞的培养。例如cho细胞表达生产乙肝疫苗、cho细胞表达epo。
4、imdm细胞培养基
guilber 和iscove将dulbecco‘ medium 改良为 iscove‘s medium,用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和hepes。imdm还能够促进小鼠b淋巴细胞,lps刺激的b细胞,骨髓造血细胞,t细胞和淋巴瘤细胞的生长。imdm为营养非常丰富的培养液,因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。
m199培养基
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M199培养基
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