高效液相色谱(High-performance liquid chromatography, HPLC) 是一种色谱分析技术,依赖于泵加压后色谱柱中填充物对于样品中各组分吸附力的不同,从而实现各组分快速的分离。
高效液相色谱常用检测器
(1)紫外可见分光检测器(UVD)。
HPLC检测原理图
高效液相色谱法的特点
应用范围广:70%以上的有机化合物可用高效液相色谱法分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物;
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HPLC可以实现绝大部分物质的分离鉴定。液相色谱的诞生,源于气相色谱对于高沸点有机物分析,如蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质的局限性。自1980年代,随着适用于分离蛋白质和其它生物大分子的色谱柱进入市场以来,HPLC开拓了它在生物化学的应用领域。HPLC是目前应用最广的分析技术,质谱作为分离技术与HPLC竞争的同时又可以在多方面互补使用,如LC-MS。迪信泰检测平台使用高效液相色谱的方法,可实现对样品进行鉴定,可高效、精准的进行定量分析。
HPLC分离原理:固定相是固体吸附剂,吸附剂是多孔性微粒物质,表面有吸附中心。样品组分与流动相竞争吸附中心。各组分的吸附能力不同,使组分在固定相中产生保留时间不同,从而实现分离。
(2)双光路双流路紫外/荧光检测器(UV/FLD-1)。
(3)蒸发光散射检测器(ELSD)。
(4)液相色谱-液相色谱联用(HPLC-HPLC)。
分离效率高:可选择固定相和流动相以达到最*佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍;
分离速度快:通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成;
灵敏度高:紫外检测器灵敏度可达0.01ng;
能同时分离多种物质:一根柱子能同时分离的成份可达100种;
样品量少、容易回收:进样量在μL数量级,而且样品经过色谱柱后不会被破坏,可以收集单一组分或做制备。
可测物质
周期
中药成分
2-3
植物色素
2-3
花青素
2-3
花色苷
2-3
植物多酚
2-3
植物黄酮
2-3
生物碱
2-3
生物胺
2-3
植物激*素
2-3
动物激*素
2-3
氨基酸及其代谢物
2-3
维生素
2-3
有机酸
2-3
糖类及糖代谢物
2-3
脂肪及脂肪酸
2-3
神经递质
2-3
甾醇
2-3
核苷酸
2-3
金属元素
2-3
食品添加剂
2-3
抗*生素残留
2-3
农药残留
2-3
兽药残留
2-3
霉菌毒素
2-3
环孢素A/环孢霉素A/环孢菌素A
2-3
木酚素
2-3
吐温-20
2-3
戊二醛
2-3
其他物质
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09
09
2021
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