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05 14 2024

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书  稳定性强  特异性强  灵敏度高

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来源:[上海笃玛生物科技有限公司]
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品牌:DUMABIO
价格:1790.00 元/
供应地:上海上海市
产品型号:96T/48T


土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。货号:DM-W-S-LAP

规格:100T/48S

产品内容:

试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;临用前加入3mL丙酮溶解。

产品说明:


 

微量法


S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。

S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。

自备实验用品及仪器:

天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛(或更小)。

操作步骤: 一、样本处理

土样自然风干,过30-50目筛。二、测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,蒸馏水调零。

2、加样表:

 

测定管

对照管

土样(g

0.03

0.03

甲苯(μL

15

15

震荡混匀,室温静置15min

试剂一(μL

255

255

试剂二(μL

30

-

30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。流水冷却至室温。

试剂二(μL

-

30

14000g 常温离心10min,取200μL上清于405nm处测定吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算?A=A测定管-A对照顾管。

三、酶活计算公式

1. 按微量比色皿计算:

 

酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 对硝基苯胺为一个酶活力单位。

S-LAP 活性(U/g)=△A÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.507×△ A÷W 。

ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,300μL=3×10-4 L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。

2. 按96孔板计算:

酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol 对硝基苯胺为一个酶活力单位。

S-LAP 活性(U/g)=△A÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.844×△ A÷W 。

ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103 L/mol/cm;d:96 孔板光径,0.6cm;V 反总:反应总体积,300μL=3×10-4 L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。


本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!

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