土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。货号:DM-W-S-LAP
规格:100T/48S
产品内容:
试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;临用前加入3mL丙酮溶解。
产品说明:
微量法
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备实验用品及仪器:
天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛(或更小)。
操作步骤: 一、样本处理
土样自然风干,过30-50目筛。二、测定步骤
1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,蒸馏水调零。
2、加样表:
测定管
对照管
土样(g)
0.03
0.03
甲苯(μL)
15
15
震荡混匀,室温静置15min。
试剂一(μL)
255
255
试剂二(μL)
30
-
30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。流水冷却至室温。
试剂二(μL)
-
30
14000g 常温离心10min,取200μL上清于405nm处测定吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算?A=A测定管-A对照顾管。
三、酶活计算公式
1. 按微量比色皿计算:
酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP 活性(U/g)=△A÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.507×△ A÷W 。
ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,300μL=3×10-4 L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
2. 按96孔板计算:
酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol 对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP 活性(U/g)=△A÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.844×△ A÷W 。
ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103 L/mol/cm;d:96 孔板光径,0.6cm;V 反总:反应总体积,300μL=3×10-4 L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!
05
14
2024
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书 稳定性强 特异性强 灵敏度高
来源:[上海笃玛生物科技有限公司]
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价格:1790.00
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供应地:上海上海市
产品型号:96T/48T