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05 14 2024

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒  稳定性强  6特异性强  灵敏度高

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来源:[上海笃玛生物科技有限公司]
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地址:上海上海市青浦区航昌路199弄
品牌:DUMABIO
价格:1790.00 元/
供应地:上海上海市
产品型号:96T/48T

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒说明书

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:DM-W-S-NAG

规格:100T/48S 产品内容:

试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;


微量法


试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2mL丙酮溶解,用不完的试剂仍-20℃保存; 试剂三:液体30mL×1 瓶,4℃保存;

标准品:液体1mL×1支,5 mmol/L的对硝基苯酚溶液,4℃保存。临用前用试剂一将标准品稀释50倍得100μmol/L 的标准溶液。

产品说明:

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体某些病理状态密切相关。

S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、30-50目筛(或更小)和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理:

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。二、测定步骤:

(1) 分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至400nm,蒸馏水调零。

(2) 加样表:

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

风干土样(g

0.03

0.03

-

-

试剂一(μL

165

165

-

-

试剂二(μL

15

-

-

-

混匀,37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min盖紧, 防止水分散失,流水/冰浴冷却。

-

-

试剂二(μL

-

15

-

-

12000g 25℃离心10min,取上清液

-

-

上清液(μL

100

100

-

-


标准品(μL

-

-

100

-

蒸馏水(μL

-

-

 

100

试剂三(μL

200

200

200

200

室温静置2min 后,10000g 常温离心5min,吸取200μL上清于微量玻璃比色皿或直接在96孔板中,测定400nm处的吸光值A。分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA=A 测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A 空白管。每个测定管设一个对照管。

三、S-NAG 活力计算:

单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol  对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-NAG活力(U/g 土样)=ΔA÷ (ΔA标准÷C标准)×V 反总÷W÷T =0.432× ΔA÷ ΔA标准÷W。T 反应时间,1h=1/24d;V  反总:反应体系总体积:1.8×10-4  L;C标准:标准溶液浓度,100μmol/L;

W:样本质量。

注意事项:

1、当ΔA 大于 1 时,建议将上清液稀释后进行测定;当ΔA 小于 0.02 时,建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。


本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途! 2 页 共 2 页

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