猪白介素23 p40 (IL-23 p40)ELISA试剂盒

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收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
( 二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。
注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造
成生长不好。


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1.当天下午3点30分之前下单，可当天发货。
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此活动截止日期为2016年6月15日，此活动解释权为上海笃玛生物科技有限公司所有。

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下面说下ELISA实验常遇到的问题以及解决方案。

异常
结果描述                                                            
【白板】
显色步骤结束后，酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。

原因分析                                                   
1.试剂已过效期，或不同试剂盒组分混用
2.错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B
3.洗板及加样过程中，酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力
4.终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配置
5.蒸馏水有问题

对策
1.检查试剂的组分及批号，确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用
2.严格按说明书的步骤操作，加完试剂后可观察一下液面高度是否一致，以减少漏加现象
3.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净
4.每次配制时都应看清标签标明物质
5.确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染，与好蒸馏水比较 


显色弱、灵敏度 低

实验结束后，包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。

1.试剂盒超过期， 超过有效期的产品可能会产生很弱的信号； 试剂盒没有按规定进行保存，受高温影响
2.试剂、样品用前未平衡至室温
3.加入试剂的体积和时间有误， 移 液器计量不准，吸嘴内水分太多或不清洁
4.洗板及加样过程中，酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力
5.孵育时间及孵育温度未达到要求 ，反应板放入培养箱时注意温度并及时调整
6.洗板次数过多，或浓缩洗液稀释倍数不符合要求；洗涤冲击力太大。浸泡时间太长
7.显色剂加量不足或顺序颠倒，或混合后加入
8.底物作用时间不够
9.蒸馏水水质有问题

对策：
1.实验前检查试剂的组分及批号，确认试剂未过期。 不要将试剂盒长时间置于常温下，按使用规定储藏。
2.从低温冰箱中取出的试剂及样品应置室温平衡 20分钟左右。
3.确定所使用的试剂体积正确，加入时间适当。 校正移液器，移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快，排放应完全
4.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净，确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染
5.孵育温度应控制在 37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作。 保温期内不宜多开门，以免影响保温
6.严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板，减小洗涤冲击力，按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数
7.显色剂滴瓶垂直向下，持力均匀，滴速不宜过快，先加显色剂?A，后加显色剂B，不可将A、B液混合后加入
8.准确定时
9.测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响

实验结束后阴阳性对照正常，质控正常，但临床标本感觉显色较弱 
1.待测标本中可能不含强阳性标本，故结果可能是正常的
2.标本加入叠氮钠作为防腐剂

对策
1.如有怀疑，可复检
2.酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂，可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂

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