人Dickkopf相关蛋白1 (DKK1)酶联免疫试剂盒
对策
1.实验前检查试剂的组分及批号，确认所有组分均属于对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用
2.避免试剂组分间的交叉污染，确保吸头、容器的干净
3.显色剂 A、B未使用前避光保存
4.孵育温度应控制在 37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作。
5.严格按说明书要求洗板
6.放置时间（自然放置 1~2h）及离心转速（3000r/min）、离心时间（15min）应引起注意

出现随机 性的花板、跳孔现象

1.样品离心不完全，反应孔内发生凝血或残留细胞成分
2.加样时交叉污染
3.手工洗板造成的交叉污染
4.洗板机加液头堵塞导致加液不满或吸液残留量较大，造成 花板、跳孔
5.拍板时交叉污染 

对策
1.充分离心， 3000rpm6分钟以上
2.加标本时尽量 避免交叉污染。如盛标本的试管周围常有血痂，易脱落，应远离酶标板
3.手工洗板时前 3次注洗液后应立即弃去，后几次再设定浸泡时间，可减少交叉污染
4.疏通加液头，使洗板时每孔均注满洗液，吸液时残留量要小
5.洗板完毕拍板时用合适的吸水纸巾，不要把无关物质拍进板孔，并尽量不要在同位置拍，以免交叉污染

人Dickkopf相关蛋白1 (DKK1)酶联免疫试剂盒
假阳性

假阳性现象是一个现象，可参考上文 “灵敏度过高、板底高、高背景” 中的分析。这里只列举常见的原因及对策
1.计算 Cutoff值时使用的公式不正确，导致计算得出的CutOff值过低，从而导致出现假阳性
2.洗板时未能注满洗液或洗板次数、浸泡时间不够， 洗涤不充分，样 品中有其他成分残留 导致花板、跳孔，假阳性增多
3.血清标本处理不当，如未除去细胞成分、纤维蛋白原及其它干扰物可出现孔底由变蓝的跳孔现象，此标本重复实验结果往往是阴性
4.厂家试剂质量的变化造成
5.水质问题
6.加酶量过多（如 50uL误认为100uL）或丙肝酶稀释时加量过多
7.培养箱温度超过 37℃或酶结合物反应时间或底物显色时间超过
8.底物配制时间过长、或底物污染
9.该批样品放置时间过长，样品污染
10.移液嘴重复使用，未洗净或消毒不完全而用于加酶或底物

对策
1.CutOff值计算公式应严格参照所属产品的说明书，应注意各个酶免产品的Cutoff值计算公式不尽相同
2.严格按说明书要求洗板。调整洗板机时，应注意有时仪器标示的液量与实际液量并不相符，应根据实际情况调整至每孔注满
3.放置时间（自然放置 1~2h）及离心转速（3000r/min）、离心时间（15min）应引起注意
4.国家标准要求提高灵敏度时，厂家试剂灵敏度也相应提高，假阳率常常有所上升，但只要在合理范围，是可以接受的
5.防止蒸馏水污染
6.加酶前检查移液器调节量是否准确，稀释酶时思想要集中。
7.放入板以前要检查培养箱的温度，准确定时
8.底物应在酶反应完毕即将洗涤前 5分钟配制，注意避光
9.样品应保持新鲜，或低温保存，防止污染
10.移液嘴尽可能一次性使用

人Dickkopf相关蛋白1 (DKK1)酶联免疫试剂盒
重复性差
1.样品数量不一，加样时间长短不一
2.样品加入后未混匀
3.酶标仪滤光片不对或输入波长不对
4.酶标仪测定重复性差
5.洗涤不正确
6.温育条件不一致（一次用水育，一次用恒温箱）
7.慎多加或少加酶或显色剂
8.阈值附近时阴时阳
9.加样量不足、保温时间、洗涤条件一致

对策
1.重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近
2.加样后在混匀器上充分混匀
3.TMB显色用450/630波长
4.校对酶标仪
5.洗涤液注满各孔但不要溢出。洗板时反应板面向下，垂直用力甩净内容物（可多甩几次），在干净、无或少尘的吸水材料上拍干。洗板机洗板时不应有堵孔，洗涤应充分
6.恒温箱温育较水浴显色深，?OD值高出0.1-0.15,最好均采用恒温箱.如用水浴水温应控制在37℃
7.多加时显色深，少加则浅，用记号笔圈上，便于分析
8.同一样品做三个复孔，以二个（含二个以上相同结果为准）
9.尽可能使用同一移液器和装紧吸嘴重复测定标本。条件、人员等应尽量与上次保持一致



细胞：
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。 
1. 取出25cm2 培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静
置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。 
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 
3. 细胞传代 
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次； 
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观
察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化； 
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全
培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养； 
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。 

人Dickkopf相关蛋白1 (DKK1)酶联免疫试剂盒
四、注意事项 
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月 
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作 
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态 
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和Procell技术部
沟通由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知
细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 
5. 该细胞只可用于科研 
备注：由于实验所用试剂与操作环境的不同，以上方法供各实验室参考。






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鉴于产品的特殊性，请严格按照说明书操作！！！

本产品仅供科研实验，不做其它用途！！！


产品包装：盒装

性状：瓶装液体   

规格：96T/48T

保存条件：2-8℃

保存期限：6个月

运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者生物冰袋低温运输。


性能:
1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2．灵敏度：最低检测浓度小于10 pg/ml。
3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

订货说明：
1.当天下午3点30分之前下单，可当天发货。
2.进口期货货期一般3-4周，部分产品现货请咨询业务人员。
3.客户对定制产品有特殊要求，要提前备注。
4.送货方式：快递上门，如特殊产品业务员亲自派送。
5.客户收到产品，如发现产品有破损及时与我司联系，我司会在第一时间处理。
6.笃玛品质保证，价格优势。生物种类试剂齐全，欢迎广大客户咨询订购。

人Dickkopf相关蛋白1 (DKK1)酶联免疫试剂盒
1.试剂盒的保存：未开封试剂盒请置于2-8℃环境中储存，并在有效期内使用；已开封试剂盒，请尽快使用，避免稀释液长菌或组份降解失效；切勿酶标板置于-20℃环境中储存，底物溶液保存或使用时请务必避光。
2.工作试剂配制：请临用前30分钟内配妥。初次使用，各组份试剂请务必摇匀或离心，以便试剂集中到管底；因实际装量多余标示装量多余标示装量，配制工作试剂请用精准的计量工具（移液枪或量筒等）量取，切勿不经量取直接使用。
3.酶标板：铝箔袋出现漏气并不影响板的储存及使用；酶标板条可拆卸，每次根据实验需要量取孔进行操作，切勿不经拆卸用整块板来进行预实验。
4.上样：一次加样时间推荐控制在5分钟以内，并保证每孔上样量一致，以确保反应一致性。
5.孵育：实验中为防止样本蒸发或污染，请于酶标板上加盖或覆膜，稳拿轻放，防止外溅；随时观察温箱温度是否恒定于37℃，及时调整，孵育反应期间，温箱不宜开启太多次，以免影响温度平衡。
6.洗涤：确保蒸馏水水质合格；为保证每孔上样量一致，请使用多通道移液枪操作，若采用洗板机，请确保洁净度，以免污染；切勿冲洗，洗涤力道适中，垂直甩板，充分洗涤，降低边缘效应。
7.组份：不同批次实际，不可混用；不同组份瓶盖间避免交叉使用，以免污染；切勿随意替换试剂盒中组份。
8.读值：加入终止液后，请在5分钟之内读数，最迟不超过15分钟，以免产生褐色沉淀物，影响吸光度；请确保酶标仪的设置无误，滤光片经校准合格。