测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
  1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。24μg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
  12μg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
  6μg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
  3μg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
  1.5μg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
  2.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
  3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
  6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
  7.温育：操作同3。
  8.洗涤：操作同5。
  9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
  10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
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