一、药物概述及检测原理

本试剂盒利用替米考星抗体与替米考星可产生特异性

结合的性质，先在酶标板上预包被抗原，再加入标准

品（样本）和替米考星抗体，样本或标准品中的替米

考星药物与固定在酶标板上的抗原竞争替米考星抗体

，最后加入底物催化显色。此时显色深度与标准品（

样本）中替米考星药物的含量成反比。

二、试剂盒内包含组分：

标准品工作液：0  ppb、0.5  ppb、1.5  ppb、4.5  ppb

、13.5  ppb,1  mL/瓶。
96孔酶标板：1块
替米考星抗体工作液：1瓶（6mL/瓶）
酶标Ⅱ抗工作液：1瓶（6  mL/瓶）
20×浓缩洗涤液：1瓶（30  mL/瓶）
10x浓缩复溶液：1瓶（10  mL/瓶）
底物A液：1瓶（6  mL/瓶）
底物B液：1瓶（6  mL/瓶）
终止液：1瓶（6mL）
说明书
盖板膜
自封袋
合格证
  三、用户需要自备的设备和试剂

仪器：

酶标仪（检测波长450  nm、630  nm）
电子天平（精度：0.01  g）
离心机（4000  g及以上）
生化培养箱（可调25℃）
摇床
旋涡振荡器
氮吹仪
微量移液器：（20μl-200μl、100μl-1000μl各一

支、30-300ul八道排枪）
计时器
试剂：

无水碳酸钠
碳酸氢钠
乙酸乙酯
正己烷
去离子水
  四、检测步骤

准备：将要使用的酶标板条插入酶标板架上，并记录

各标准品和样品的位置，为减小检测值波动建议做双

孔平行实验（每个样本/标准品点两孔），未使用的酶

标板条用自封袋密封后，保存于2-8℃环境中以防变质

；
加样：向对应微孔中加入标准品工作液/样品溶液50  

μL，向每孔中加入50  μL酶标二抗工作液；再向每孔

中加入50  μL抗体工作液；
孵育：轻轻振荡酶标板10  s，使孔内液体充分混匀后

，盖好盖板膜于25℃避光反应20  min；
洗涤：取出酶标板后小心揭开盖板膜，倒出板孔中液

体后，在每孔加  250  μL洗涤工作液，浸泡15-30s后

倒掉洗涤工作液，然后再加入洗涤工作液重复洗涤3~4

次后，将酶标板倒置于吸水纸上，用力拍干；
显色：在每孔中加入100  μL  底物A和底物B的混合液

（注：底物A液、底物B液必须按体积1:1充分混合，混

合液在10  min内使用，切不可使用金属容器盛装、搅

拌试剂以免底物变质失效）；
孵育：轻轻振荡酶标板10  s，使孔内液体充分混匀后

，盖好盖板膜于25℃避光反应10  min；
终止：在反应后的微孔中加入终止液50μL/孔，底物

液由蓝变黄表明终止成功。
读数：终止后的酶标板应在5  min内用酶标仪读数，建

议使用450  nm、630  nm双波长读取酶标板吸光度值。
五、试剂盒参数  
试剂盒灵敏度：0.5  ppb；
标准曲线范围：0.5  ppb-13.5  ppb；
板内变异系数：<5%；
板间变异系数：<15%；
B0吸光度最佳值：>0.8；
回收率：90%±30%
样品最低检测限：
　组织方法一猪肉、鸡肉…………………约5ppb

    组织方法二猪肉、鸡肉…………………约1ppb

    蜂蜜……………………………………约5ppb

六、试剂盒贮存条件

试剂盒最佳贮存温度为2-8℃，切勿冻存。
未使用完的酶标板条须密封保存2-8℃的环境中。